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色譜柱那么多,維護方式快拿走!(二)

發布時間:2020-01-07        內容來源:月旭科技

繼我們的色譜柱那么多,維護方式快拿走!(一)出之后深受大家的關注和歡迎,很多朋友詢問系列篇(二)什么時候更新呀,今天就來滿足一下大家的期待,跟隨小編往下看哦!



氰基柱

氰基柱也是一款正相、反相模式下均可使用的色譜柱。氰基柱在反相條件下的弱點是對中等極性溶劑十分敏感,如THF(四氫呋喃)EtOH(乙醇)等,因此:

1、使用過程中要避免這些中等極性溶劑,也不可保存在這類溶劑中;

2、氰基柱相切換使用下要充分過度,然后把流動相和混標全部新配,避免溶劑的影響,按照100%甲醇--100%乙腈--100%異丙醇--100%乙腈,各項沖洗40min以上(異丙醇粘度大,壓力高,注意調整流速在合適的范圍內);

3、流動相平衡足夠長的時間(必要時打底進樣),待基線穩定了,按照空進樣--空白溶劑--對照品--供試品的順序進樣;


SCX/SAX

陽/陰離子交換(SCX/SAX)色譜柱要避免高比例有機相和高濃度鹽(>100mM),否則鍵合相易脫落,或鹽析堵塞柱子,色譜柱也不建議存在高比例有機相中;另外色譜柱存放時間過長也易造成鍵合相脫落(一般建議在4℃下保存在10%甲醇中,然后隔一天拿出來沖洗一下,確保鍵合相處于活性的狀態)。


1、當出現分離度下降,保留時間漂移等問題時,將柱子先用10%甲醇沖洗(1-2小時),將鹽和酸沖干凈后,重新配新的流動相,平衡色譜柱。充分平衡后按照進空針--空白溶劑--對照品--供試品的順序進樣;

2、若10%甲醇水沖洗無效的話,SCX色譜柱用100mmol/L的NaClO4溶液(調節pH 4.0)--10%甲醇水,各項溶劑沖洗60min以上;

3、若10%甲醇水沖洗無效的話,SAX色譜柱用1M的硝酸銨--40%甲醇--100%異丙醇--水--10%甲醇水,各項溶劑沖洗60min以上;



Sugar-H/Sugar-Ca

聚合物基質的色譜柱都是以樹脂的膨脹形態緊密裝填的,如果樣品經過了很好的前處理,那么大部分問題都與柱床和填料有關。使用過程中應注意控制柱溫流速,避免溫度和脈沖造成的柱床損壞,以及有機相最大比例不宜超過5%(具體可參見月旭公眾號推文:還在頭大色譜柱的使用?快收好這份干貨)


Sugar-H:當出現峰形異常,柱效下降,分離度降低等問題時,可用:

1、pH2.5的酸溶液低流速沖洗12小時,酸可以用硫酸、鹽酸、磷酸、高氯酸(避免使用硝酸等強氧化酸),pH都調至2.5。沖洗時注意溫度設置80℃85℃,流速多為0.5mL/min。配制酸溶液的水中盡量不要有其他陽離子的干擾;

2、沖洗完后用流動相平衡,然后按照進空針--空白溶劑--對照品--供試品的順序進樣;

3、日常使用時注意柱頭端和柱尾端是否有溫差,以及配制流動相的水中盡量不含其他陽離子(尤其注意Na?、K?等一價離子)


Sugar-Ca:鈣型陽離子柱的問題多是使用過程中Ca2?流失所致,因此需注意及時補充流失的Ca2?(一般在出現上述問題時,或使用流動相5L之后,需要用Ca2?溶液重新活化):

1、用0.5g/L EDTA Ca(CAS:23411-34-9)溶液低流速沖洗12小時,沖洗時注意溫度設置80℃85℃,流速多為0.5mL/min。配制Ca2?溶液的水中盡量不要有其他金屬陽離子的干擾;

2、沖洗完后用流動相平衡,然后按照進空針--空白溶劑--對照品--供試品的順序進樣;

3、日常使用時注意柱頭端和尾端是否有溫差,以及配制流動相的水中盡量不要有其他金屬陽離子的干擾(尤其注意Na?、Mg2?等堿金屬離子)


Zn粉還原柱

Zn粉還原柱不能碰水,遇水后Zn粉會失活,所以遇到問題時一般處理按照:

1、100%甲醇沖洗,1.0流速反沖3小時以上

2、沖洗完后用流動相平衡,然后按照進空針--空白溶劑--對照品--供試品的順序進樣;

3、若沖出了白色的物質則可能是填料已損壞,需重新購買色譜柱;


各位小伙伴想了解更多有關高效液相色譜柱的使用維護與注意事項,歡迎咨詢月旭科技當地銷售人員或撥打熱線400-810-6969垂詢。


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